REAGEN™大腸桿菌O157:H7酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒
RNB93002
1．概述
REAGEN™大腸桿菌O157:H7酶聯(lián)免疫檢測試劑盒是用來檢測食品和飼料中大腸桿菌O157:H7的含量。大腸桿菌O157:H7是腸桿菌家族的一種革蘭氏陰性菌，“O”指的是菌體抗原，“H”指的是鞭毛抗原，這是大腸桿菌數(shù)以百計血清型中的一種。大多數(shù)片段是無害的，通常存在在哺乳動物的腸中。這個O157:H7片段能產(chǎn)生志賀祥毒素，是腸出血性大腸桿菌（EHEC）級的一個成員，會導(dǎo)致嚴(yán)重的疾病，感染上腸出血性大腸桿菌的人會出現(xiàn)腸出血癥和溶血性尿毒綜合癥。污染致病原主要存在于：生的細(xì)紋牛肉、未經(jīng)巴氏消毒的牛奶、未經(jīng)處理的水、果汁、嫩芽、生菜和臘腸中。
檢測食品中大腸桿菌O157:H7既費力又費時。REAGEN™大腸桿菌O157:H7酶聯(lián)免疫檢測試劑盒為國家管理部門、食品生產(chǎn)商、質(zhì)檢部門提供了方便有效的方法，檢測水平為105細(xì)胞/ml。
2．試劑盒原理
該試劑盒基于酶聯(lián)免疫檢測原理，大腸桿菌O157:H7的單克隆抗體包被在微孔內(nèi)。分析過程中，如果樣品中有大腸桿菌存在，當(dāng)加入樣品時，即可與單抗結(jié)合，在孔中加入適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液可以快速增菌。酶標(biāo)記的二抗與板孔中包被的一抗結(jié)合，加入底物后顏色的深淺與樣品中大腸桿菌O157:H7的含量相關(guān)。
3. 試劑盒組成
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試劑盒組成
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規(guī)格
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保存
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抗體包被的酶標(biāo)板
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12×8 孔
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2-8°C
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1×陰性對照
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1×1ml
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-20°C
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1×陽性對照
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1×1ml
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-20°C
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50×HRP- 二抗
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3×50ml
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-20°C
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二抗稀釋液(
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1×20ml
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2-8°C
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20×濃縮洗液
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1×30mL
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2-8°C
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終止液
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1×20mL
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2-8°C
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TMB底物
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1×10mL
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2-8°C
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4. 檢測限：105細(xì)胞/ml
5. 交叉反應(yīng)：
本試劑盒可檢測大腸桿菌O157:H7抗原
6．其他需要而本試劑盒未提的設(shè)備或材料
ü 酶標(biāo)儀（450nm）
ü 恒溫培養(yǎng)箱
ü 漩渦振蕩器
ü 移液器(10、20和100mL，1mL各一支)
ü 多道移液槍：50-300ml（可選擇）
ü mTSB培養(yǎng)基：含有10g/L酪蛋白氨基酸和1.5g/L磷酸氫二鉀的胰化酪蛋白大豆培養(yǎng)基
7.注意事項
實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得最佳實驗效果。
ü 樣品中含有大腸桿菌，請小心使用。
ü 進行樣品準(zhǔn)備過程中，操作人員必須有好的微生物操作技能。
ü 不要使用過期的試劑盒。
ü 不同批次的試劑盒不要混用，確保二抗正確稀釋。
ü 盡量保持室溫20-25℃，避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應(yīng)該鋪墊紙巾或其他物料。
ü 水質(zhì)量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。
ü 加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。
ü 孵育時間的計算越規(guī)范越好，保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性，先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。
ü 從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品，降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)量的風(fēng)險。
ü 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。