診斷試劑中化學發光底物吖啶酯的標記原理化學發光免疫檢測中，我們用吖啶酯先標記上抗體蛋白，才能在免疫反應后對待測物進行檢測，因此如何標記抗體就非常的關鍵了。吖啶鹽和相關化合物已被廣泛證明為非常有用的化學發光標記物，其穩定性、標記特異性和檢測靈敏度都超越放射性同位素。

吖啶酯-NHS即吖啶琥珀酰亞胺酯(本試劑盒所提供)能與蛋白質的一級氨基發生反應。在堿性條件下，NHS作為離去基團被取代，蛋白質與吖啶酯形成穩定的酰胺鍵。反應完成后，多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。在堿性過氧化氫存在下，吖啶標記的蛋白不需要酶催化就可自行發光。

因此激發液的加入導致反應體系立即釋放約430nm的光子，通過使用標準光度計luminometer計數光子數量就可檢測蛋白質的濃度。因為此發光過程是十分短暫(整個過程在2秒鐘內完成)，樣品必須直接放在光度計內部光子探測器前面。蛋白質、多肽、抗體、核酸都可以用吖啶酯標記。

化學發光試劑這里需要注意的是，溶解吖啶琥珀酰亞胺酯時，使用的DMF必須嚴格無水，防止吖啶酯水解不使用時，干燥密封-20°℃保存。針對傳統吖啶酯，在其結構上進行了修飾，增大了位阻，增強了抗水解性。

如在室溫下，在pH為7.0的PB緩沖液中很穩定。如果是不含-NHS的吖啶羧酸需要加入縮合劑EDCI等，才能與含胺基的蛋白發生偶聯反應。吖啶酰肼，含有游離氨基，吖啶酰肼末端適用直接偶聯含有醛基的多糖核酸或者蛋白質等。

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