為實(shí)驗(yàn)選擇合適的生物緩沖液（Tris,Mops,Hepes,Pipes等）可能很棘手，緩沖區(qū)選擇過(guò)程就像玩“猜猜誰(shuí)”。像游戲一樣，一般來(lái)說(shuō)，可以從非常廣泛的緩沖區(qū)列表開(kāi)始，然后慢慢地提出問(wèn)題和研究答案以縮小選擇范圍。

在下文將給大家提供一些選擇生物緩沖液的注意事項(xiàng)。

1. 確定實(shí)驗(yàn)的pH：

在許多實(shí)驗(yàn)中，需要更改條件以使蛋白質(zhì)在溶液中保持完美狀態(tài)。假設(shè)在pH 7.4的條件下進(jìn)行了模擬生物條件的實(shí)驗(yàn)，但是蛋白質(zhì)在此pH值下不穩(wěn)定，因此需要優(yōu)化這種情況。要注意的是，目標(biāo)pH值通常離蛋白質(zhì)等電點(diǎn)（pI）大約一個(gè)pH單位（有時(shí)稍遠(yuǎn)）。pI是給定的分子或蛋白質(zhì)不帶凈電荷的pH值。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)達(dá)到其pI時(shí)，它的溶解度就不那么高。

2. 考慮不必要的緩沖區(qū)交互：

決定使用哪個(gè)緩沖區(qū)的另一個(gè)重要步驟是確定是否存在負(fù)緩沖區(qū)交互。舉個(gè)例子，如果正在使用一種酶，那么有機(jī)緩沖液可能會(huì)影響酶功能的好壞。

3. 實(shí)驗(yàn)時(shí)需要考慮到的一些問(wèn)題：

就像游戲一樣，可以提出一些問(wèn)題，以確保獲得正確的緩沖。舉個(gè)例子，1.溶液中是否存在可能于緩沖液絡(luò)合的金屬？2.目標(biāo)蛋白是一種酶嗎？它屬于哪一類？3.配體結(jié)合，蛋白質(zhì)穩(wěn)定性或電泳的離子強(qiáng)度要求是什么？像這樣的一些問(wèn)題根據(jù)實(shí)驗(yàn)時(shí)的具體情況來(lái)提問(wèn)并思考，將進(jìn)一步幫助找到合適的生物緩沖液（Tris,Mops,Hepes等）

4. 考慮下游實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)有什么影響：

研究人員經(jīng)常遇到的一個(gè)絆腳石是，他們將從緩沖區(qū)開(kāi)始，并發(fā)現(xiàn)它不適用于下游應(yīng)用程序。舉個(gè)例子，已知Tris會(huì)對(duì)Bradford assay產(chǎn)生負(fù)面影響。其他生物緩沖液會(huì)對(duì)質(zhì)譜產(chǎn)生負(fù)面影響。不幸的是，在執(zhí)行第1步和第2步之后，可能已經(jīng)縮小了緩沖區(qū)的范圍，只是發(fā)現(xiàn)它在將來(lái)可能無(wú)法很好地工作。在這種情況下，必須進(jìn)行一些研究以找到合適的替代方法。但是，既然已經(jīng)縮小了所需的特征，那么進(jìn)行這項(xiàng)研究就會(huì)容易一些。

5. 尋找合適的緩沖區(qū)：

當(dāng)知道要使用什么緩沖區(qū)時(shí)，就應(yīng)該區(qū)采購(gòu)緩沖區(qū)了。對(duì)于大多數(shù)研究人員而言，底價(jià)和純度基本上是在哪里購(gòu)買緩沖液的重要標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)然，也可以去找大品牌的公司，那么將會(huì)獲得合適的產(chǎn)品。但是，其價(jià)格也一定不會(huì)便宜。取而代之，湖北新德晟材料有限公司具有不斷增長(zhǎng)的高質(zhì)量緩沖液產(chǎn)品，而且價(jià)格將會(huì)是您心里的合適價(jià)位。

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