|
|||||||||||||||||||||||
|
樣品類型
|
注意事項
|
|
細菌
|
1.通用載體或自己構(gòu)建的載體，都請注明載體名稱、抗生素類型以及具體測序引物。
2.我們提供Amp，Kan,Tet及Chl四種抗生素；特殊抗性、特殊培養(yǎng)條件的樣品，請您提供已經(jīng)培養(yǎng)好的5ml新鮮菌液或沉淀好的菌體。
3.如果是病毒(包括噬菌體)DNA，低拷貝質(zhì)粒以及BAC DNA，請您純化好模板直接用于測序。
4.建議您提供穿刺菌。如果是菌液則必須是新鮮的；加甘油后冷凍保存的菌株請您復(fù)蘇后再提供。
5.樣品太少會導(dǎo)致培養(yǎng)時間過長甚至出現(xiàn)培養(yǎng)細菌失敗，以至延誤您的實驗，所以提供的菌液至少200ul以上。
6.務(wù)必注明是否有特殊結(jié)構(gòu)：GC rich;GC cluster、Poly(A)、Poly(T)、重復(fù)序列及引物同源序列等。
|
|
質(zhì)粒
|
1.為確保測序的成功率和質(zhì)量，建議您盡量提供菌種測序。
2.因特殊原因只能提供質(zhì)粒模板測序時，必須保證質(zhì)粒是高純度的，而且須溶解在滅菌的去離子水中而不是TE中。濃度大于100ng/ul，體積10ul以上，注明抽提方法。
3.如果是病毒(包括噬菌體)DNA，低拷貝質(zhì)粒以及BAC DNA，請純化好模板直接用于測序。
4.插入片段有特殊結(jié)構(gòu)時必須注明，特別是含有通用引物的同源序列。
5. 務(wù)必注明是否有特殊結(jié)構(gòu)：GC rich;GC cluster、Poly(A)、Poly(T)、重復(fù)序列及引物同源序列等。
|
|
PCR產(chǎn)物
|
1.原則上收取高質(zhì)量的PCR原液， 片段大小為200～1500bp。
2.取3ul原液電泳檢測，為明亮單一條帶。
3.提供未純化產(chǎn)物測序，PCR原液不少于50ul；須注明產(chǎn)物的體積、片段大小、濃度，是否經(jīng)過Agarose膠純化。
4.提供已純化的產(chǎn)物測序，體積不少于15ul，PCR產(chǎn)物須溶解在滅菌的去離子水中而不是TE中；注明提供PCR產(chǎn)物的體積、片段大小、濃度，是否經(jīng)過Agarose膠純化。
5.提供的測序引物，濃度不低于5pmol/ul(5umol/L),要求PAGE純化，體積15ul以上，樣品多將適當增加量。
6. 務(wù)必注明是否有特殊結(jié)構(gòu)：GC rich;GC cluster、Poly(A)、Poly(T)、重復(fù)序列及引物同源序列等。
|
|
備注
|
我們?yōu)槟峁┑拿赓M通用測序引物信息。
2.隨機引物（RAPD）、含簡并堿基或長度小于15的引物不適合用于測序。
|
